请简述分子生物学检验技术在临床实验诊断中的应用。请帮忙给出正确答案和分析 谢谢!
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参考解答
正确答案:(1)病原生物基因:①菌种鉴定:PCR产物直接测序和PCR—DNA探针杂交等技术可以快速、准确地用于结核杆菌菌种的鉴定;②确定病毒感染和病毒载量:荧光定量PCR、支链DNA和核酸序列依赖扩增等技术可以对病毒感染病人血清中病毒种类和载量进行测定是明确感染原、判断病情及传染性、监测临床疗效的客观和有效指标;③病毒分型:病毒基因组的变异常引起病毒生物学性状的改变从而导致感染机制的变化和血清学检测指标的改变不同的病毒基因型可产生不同的临床症状和不同的病情预后基因变异的机制也使病毒产生变异株从而在临床用药时产生耐药性;④细菌耐药监测和分子流行病学调查:用随机扩增多态性DNA、核酸序列依赖扩增等技术进行耐药基因的分型和同源性分析对选择治疗方案、控制病原菌的感染传播和暴发流行有指导价值。(2)基因变异:①致病基因的分子缺陷:用DNA印迹技术、PCR或其相关技术、突变检测技术、基因表达产物量分析等技术可以确定疾病的分子缺陷达到明确诊断疾病的目的;②线粒体基因突变:用PCR技术和突变检测技术对相应线粒体基因作突变检测和筛查是寻找mtDNA点突变的有效手段对于诊断线粒体遗传病有重要价值;③肿瘤相关基因:分子生物学技术可用于肿瘤相关基因的研究包括基因结构的改变、癌基因激活和抑癌基因失活机制、信号传导通路中相关分子的变化等。(3)基因多态性:①基因定位和疾病相关性分析:通过分析遗传标志的多态性说明遗传标志和易感基因之间存在连锁关系从而将致病基因定位于染色体相应位点;分析遗传标志的多态性还可以推测所研究的遗传标志和某个遗传病易感位点之间的因果关系即遗传标志与疾病的关联程度;②疾病诊断和遗传咨询:单基因遗传性疾病的分子诊断除了对先证者等病人进行基因缺陷的分析以外还需要对家系中其他成员进行疾病风险评估。当孕妇为携带者时还必须对未出生的胎儿进行产前诊断以明确其是否患病。通过分析基因内或基因外的多态性标志位点并判断这些标志位点与致病基因是否存在紧密的连锁关系而达到诊断目的;③多基因病的研究:分子生物学技术在多基因病中的应用主要是检测相关基因的多态性多态性分析有助于了解疾病的发生机制、疾病的分类、靶器官损伤情况、指导个体化用药和评估病情预后等;④器官移植配型和个体识别:器官移植前HLA配型也已从研究初期血清学分型方法分析HLA抗原发展到用分子生物学方法分析HLA等位基因多态性。目前法医学中犯罪嫌疑人的识别和日常生活中亲缘关系的确定也是通过分析被检个体遗传标志的多态性而实现的。
(1)病原生物基因:①菌种鉴定:PCR产物直接测序和PCR—DNA探针杂交等技术可以快速、准确地用于结核杆菌菌种的鉴定;②确定病毒感染和病毒载量:荧光定量PCR、支链DNA和核酸序列依赖扩增等技术可以对病毒感染病人血清中病毒种类和载量进行测定,是明确感染原、判断病情及传染性、监测临床疗效的客观和有效指标;③病毒分型:病毒基因组的变异常引起病毒生物学性状的改变,从而导致感染机制的变化和血清学检测指标的改变,不同的病毒基因型可产生不同的临床症状和不同的病情预后,基因变异的机制也使病毒产生变异株,从而在临床用药时产生耐药性;④细菌耐药监测和分子流行病学调查:用随机扩增多态性DNA、核酸序列依赖扩增等技术进行耐药基因的分型和同源性分析对选择治疗方案、控制病原菌的感染传播和暴发流行有指导价值。(2)基因变异:①致病基因的分子缺陷:用DNA印迹技术、PCR或其相关技术、突变检测技术、基因表达产物量分析等技术可以确定疾病的分子缺陷,达到明确诊断疾病的目的;②线粒体基因突变:用PCR技术和突变检测技术对相应线粒体基因作突变检测和筛查是寻找mtDNA点突变的有效手段,对于诊断线粒体遗传病有重要价值;③肿瘤相关基因:分子生物学技术可用于肿瘤相关基因的研究,包括基因结构的改变、癌基因激活和抑癌基因失活机制、信号传导通路中相关分子的变化等。(3)基因多态性:①基因定位和疾病相关性分析:通过分析遗传标志的多态性,说明遗传标志和易感基因之间存在连锁关系从而将致病基因定位于染色体相应位点;分析遗传标志的多态性还可以推测所研究的遗传标志和某个遗传病易感位点之间的因果关系,即遗传标志与疾病的关联程度;②疾病诊断和遗传咨询:单基因遗传性疾病的分子诊断除了对先证者等病人进行基因缺陷的分析以外,还需要对家系中其他成员进行疾病风险评估。当孕妇为携带者时还必须对未出生的胎儿进行产前诊断,以明确其是否患病。通过分析基因内或基因外的多态性标志位点并判断这些标志位点与致病基因是否存在紧密的连锁关系而达到诊断目的;③多基因病的研究:分子生物学技术在多基因病中的应用主要是检测相关基因的多态性,多态性分析有助于了解疾病的发生机制、疾病的分类、靶器官损伤情况、指导个体化用药和评估病情预后等;④器官移植配型和个体识别:器官移植前HLA配型也已从研究初期血清学分型方法分析HLA抗原发展到用分子生物学方法分析HLA等位基因多态性。目前法医学中犯罪嫌疑人的识别和日常生活中亲缘关系的确定也是通过分析被检个体遗传标志的多态性而实现的。
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