果蝇中P因子的转座酶由4个外显子(0 1 2 3)编码。此基因在生殖细胞中的转录产物长度为2.1 k
果蝇中P因子的转座酶由4个外显子(0,1,2,3)编码。此基因在生殖细胞中的转录产物长度为2.1 kb,包含所有这4个外显子,并编码具有转座酶活性的蛋白质。体细胞中P因子的转录产物长度为2.5 kb,除了含有全部的4个外显子之外,位于外显子2和3之间的内含子也被保留下来。 (1)体细胞中产生的较长的mRNA编码的蛋白质的大小只相当于在生殖细胞中产生的较短的转录产物编码的蛋白质的75%。较长的转录产物为什么会编码较小的蛋白质产物? (2)反转录酶能够用来从mRNA合成得到相应的双链DNA,这个DNA拷贝称为cDNA。如何利用cDNA和转基因技术得到在体细胞中也有转座酶活性的果蝇? (3)假设用限制酶SaZ工消化P因子后得到8个片段。用来自果蝇生殖细胞的转座酶的cDNA作为探针对它们进行Southern杂交,结果发现所有的8个限制酶切片段都显示阳性条带。上述结果说明了什么?
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参考解答
正确答案:(1)最可能的解释是内含子中带有一个与转座酶编码序列处于同一个编码框的终止密码子导致蛋白质的翻译提前终止。 (2)假设转座酶cDNA编码的蛋白产物在体细胞中有功能则可以把它与在体细胞中有活性的启动子或增强子融合导入果蝇的卵产生转基因果蝇。 (3)探针探测到所有8个片段说明每个片段都含有某个或某些外显子的一部分序列每个内含子中最多有一个Sal I的识别位点。
(1)最可能的解释是内含子中带有一个与转座酶编码序列处于同一个编码框的终止密码子,导致蛋白质的翻译提前终止。(2)假设转座酶cDNA编码的蛋白产物在体细胞中有功能,则可以把它与在体细胞中有活性的启动子或增强子融合,导入果蝇的卵,产生转基因果蝇。(3)探针探测到所有8个片段,说明每个片段都含有某个或某些外显子的一部分序列,每个内含子中最多有一个SalI的识别位点。
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