假定有1 mmol的五肽 酸水解生成2 mmol谷氨酸 1 mmol赖氨酸 没有能够定量回收其他氨基
假定有1 mmol的五肽,酸水解生成2 mmol谷氨酸,1 mmol赖氨酸,没有能够定量回收其他氨基酸。将原来的五肽用胰蛋白酶水解生成两个肽段,在pH7.0进行电泳,一个肽段移向阳极,另一个则移向阴极。用FDNB(二硝基氟苯)处理胰蛋白酶水解的一个肽段,再用酸水解,生成DNP-谷氨酸。用糜蛋白酶处理原来的五肽生成两个肽段及游离谷氨酸。试从上述试验结果写出该五肽的氨基酸序列。
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参考解答
正确答案:(1)已知5肽的组成为2Glu+1Lys另两个为Trp因Trp酸水解遭到破坏所以不能测出。(2)用糜蛋白酶水解获得两个肽段和一个游离Glu说明两个Trp位于第2、4位Glu位于第5位。(3)用胰蛋白酶水解获得两个肽段推测:Lys位于第3位FDNB处理得Glu说明第1位为Glu则肽段顺序为:Clu-Trp-Lys-Trp-Glu。(4)在pH7时一个肽段移向阳极一个移向阴极说明第一个氨基酸不是Glu而是Gln才符合题意。因此该序列是:Gln-Trp-Lys-Trp-Glu。
(1)已知5肽的组成为2Glu+1Lys,另两个为Trp,因Trp酸水解遭到破坏,所以不能测出。(2)用糜蛋白酶水解获得两个肽段和一个游离Glu,说明两个Trp位于第2、4位,Glu位于第5位。(3)用胰蛋白酶水解获得两个肽段,推测:Lys位于第3位,FDNB处理得Glu,说明第1位为Glu,则肽段顺序为:Clu-Trp-Lys-Trp-Glu。(4)在pH7时,一个肽段移向阳极,一个移向阴极,说明第一个氨基酸不是Glu而是Gln,才符合题意。因此,该序列是:Gln-Trp-Lys-Trp-Glu。
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