由酶促反应S→P测得如下数据： (1)计算Km和Vmax。 (2)当[S]=2．5×10-5 mo

正确答案：×
(1)最好用作图法求Km和Vmax值。但在此题里,当[S超过10-3mol/L时,[S对Es的变化就不敏感了。也就是说,当[S由10-3到10-2时,ν必定接近Vmax。所以：Vmax=75mol／L·min可用任何一个ν及相应的[S求Km：ν/Vmax=[S／(Km+[S)60／75=10-4／(Km+10-4)Km=15×10-4／60=0．25×10-4Km=2.5×10-5mol／L(2)当[S=2．5X10-5mol／L=Km时,ν=1／2Vmax瑚,即ν=37．5nmol/L·min当[S=5．0×10-5mol/L时,代入米氏方程,得ν=50nmol/L·min应该注意；尽管[S=Km,ν=0．5Vmax,但当[S=2Km时,ν不等于Vmax。(3)米氏方程ν=[S／(Km+[S)·K2[EO因此,在任何底物浓度下,ν都与酶浓度成正比。当[S=5．0×10-5mol/L时,[EO加倍,Vmax。加倍,ν也加倍。ν=100nmol/L·min(4)只有在测定的时间内,底物浓度基本维持不变,即[S被利用得很少时,该反应速度才可以认为是初速度。在底物浓度远大于Km时,这是不成问题的。因此,让我们在最低底物浓度时,来计算底物的消耗量。当[S=6．25×10-6mol/L时,ν=15,0nmol/L·min,或在10min内有150nmol的底物被消耗了。每升消耗的底物量／每升原有的底物量=150×10-9mol／6．25×10-6mol=2．4％一般认为,原有的底物量被消耗5％以内,此时的反应速度为真正的初速度。